如何成功進行小鼠灌胃給藥實驗?
經(jīng)口灌胃給藥是動物實驗中最為常用的一種給藥方式,尤其常用于生理、藥理、免疫等多學(xué)科的實驗動物建模,藥物毒理、藥效、劑量確定等研究中。該法操作簡便,用藥劑量準確,灌服溶液或混懸液均可,可反復(fù)給藥,適用于小鼠、大鼠、家兔等多種實驗動物。灌胃給藥看似簡單,實則大有學(xué)問,初學(xué)者常常因操作手法不當而傷到小鼠氣道或食道,甚至創(chuàng)傷小鼠內(nèi)臟引起小鼠死亡,導(dǎo)致實驗失敗。
實驗操作:
1. 實驗準備:灌胃前應(yīng)禁食4~8小時,避免太多胃內(nèi)容物阻礙灌胃注射以及影響藥物吸收速率。
2. 藥品吸取:根據(jù)小鼠體重計算好給藥量,灌胃針和注射器安裝好,吸取藥品放在一旁備用。
3. 小鼠捉拿和固定:通過抓取尾巴捉拿小鼠,盡可能避免刺激動物,抓尾巴的部位不宜太靠近尾端。將小鼠放在粗糙面上,用左手(這里視操作者為右撇子)拇指和食指抓住鼠耳和頭頸部皮膚,用左手手掌及小指無名指夾住尾部,使其頭、頸和身體(口腔和食管)成一直線,腹部面朝上,注意要固定牢不能讓其亂動,且對頸部皮膚不宜拉得太緊。若抓取不得當,切記要放開重抓,以免后續(xù)操作出問題。
4. 進針給藥:右手持注射器從一側(cè)嘴角進針入口腔,避開牙齒,經(jīng)舌面緊沿上腭徐徐插入食管下段,動作輕柔避免損傷食道,如遇阻力,可輕微上下滑動,待小鼠吞咽時賁門肌肉松弛感覺阻力消失有落空感,緩慢推進,一般當針插入小鼠3~4cm,即灌胃針3/4時,回抽注射器無空氣逆流表明針頭已進入胃內(nèi),即可注射。如動物掙扎強烈,呼吸困難或進針阻力很大,應(yīng)馬上停止進針將針拔出,待動物恢復(fù)平靜后再次嘗試。注射完畢,松開小鼠觀察如無呼吸異常,可確定灌胃成功。
大、小鼠灌胃操作是實驗動物給藥的基本技能,初學(xué)者一定要多加練習(xí),熟練掌握正確的操作方法和技巧才可以進行試驗。遇到各種情況找到原因,總結(jié)摸索,找到適合自己的技法。